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第二天，王静姝打算验证这套试剂盒的真假，昨晚上睡前她已经把实验设计好了，现在她在记录本上写下步骤，然后就开始实验。王静姝习惯在实验前把步骤先写一遍，边写边在脑海里预演接下来的实验，每一个实验都要做最好的准备，确保实验过程不出问题。
原本实验预期结果是对照组没有表达，而实验组根据药物浓度不同也许表达量会有变化，但是昨天的结果确是实验组和对照组的数据都差不多，对照标准曲线，各组的表达量还不低。她确定自己没有加错样品，也没有互相污染，但这样的结果让她不得不对自己的记忆产生怀疑。因此，这一次她干脆使用基因水平PCR验证过没有表达L因子的细胞C来做实验，这样无论如何也不会被污染。
实验前样品会用试剂盒自带稀释液稀释A，那么再取其他几种替代稀释液的试剂，PBS缓冲液、1640细胞培养基和其他合格ELISA试剂盒的稀释液B。
单纯稀释液不加样品组：A，PBS，1640，B；
稀释液加样品C上清液组：A+C，PBS+才，1640+C，B+C。
每组各设复孔。
设定好分组，接着就是按照步骤一步一步来了。
先是加入上上述分组的各溶液孵育2小时，洗涤后在加带标记抗体孵育2小时。第二次孵育时刚好可以吃午饭了。
期间，她又做了些别的实验。后来她打开电脑查看邮箱，之前构建的质粒，酶切正确的送去测序，结果应该回来了。
果然，一般来说酶切正确的质粒基本上就没问题了，但那只是间接证明DNA条带大小符合，而测序则是直接证明条带的每一个碱基都是否一致。
如此，她就该扩大带质粒的大肠杆菌培养，然后提取较多的质粒用以接下去的实验。之前保存了带质粒的大肠杆菌菌种，直接化冻，接种到液体LB培养基中，然后放在恒温摇床里培养。当然这一步现在做早了，晚上的时候再接种，然后在摇床培养过夜，第二天，提取质粒。
下午大约2点的时候，上午开始做的ELISA就可以上酶标仪检测了。王静姝又期待又忐忑的操作起酶标仪。
结果出来了，除了标准品组，用试剂盒自带稀释液的A组和A+C组都显色，且数值相近！而其他组都没有显色！
也就是说问题就出在稀释液了，稀释液里存在一种抗原能够跟包被抗体和标记抗体结合。她现在基本上推测这个试剂盒是假的了，里面的抗体和标准品（对应抗原）极有可能选用某种常见的便宜的抗原抗体。得出这样的结论还需要做一个实验。
必须用含有L因子的细胞上清液来验证。如果含有L因子的上清加稀释液A显色，不加则不显色，那么确定这套ELISA体系里的抗体绝对不是L因子的抗体。
不过目前她还没有确定L因子一定会分泌到细胞外，因此她虽然构建了过表达L的细胞系，但取其上清液如果没有显色，也不能够说明问题。
但还有另一个办法，她已经订购了一支L因子抗体兔-Anti-L，应该过几天就到了，到时候可以用该试剂盒的+标准品+Anti-L+标记抗兔二抗，若结果没有显色则说明标准品不是L因子。这个到时候在做了，现在的结果也足以说明问题，至少稀释液有问题是百分百肯定的，她必须整理一下实验数据，发给孙老师，看他怎么说。
孙书淮看到实验结果后，问她：“这试剂盒哪买的？”
王静姝递过试剂请
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第二天，王静姝打算验证这套试剂盒的真假，昨晚上睡前她已经把实验设计好了，现在她在记录本上写下步骤，然后就开始实验。王静姝习惯在实验前把步骤先写一遍，边写边在脑海里预演接下来的实验，每一个实验都要做最好的准备，确保实验过程不出问题。
原本实验预期结果是对照组没有表达，而实验组根据药物浓度不同也许表达量会有变化，但是昨天的结果确是实验组和对照组的数据都差不多，对照标准曲线，各组的表达量还不低。她确定自己没有加错样品，也没有互相污染，但这样的结果让她不得不对自己的记忆产生怀疑。因此，这一次她干脆使用基因水平PCR验证过没有表达L因子的细胞C来做实验，这样无论如何也不会被污染。
实验前样品会用试剂盒自带稀释液稀释A，那么再取其他几种替代稀释液的试剂，PBS缓冲液、1640细胞培养基和其他合格ELISA试剂盒的稀释液B。
单纯稀释液不加样品组：A，PBS，1640，B；
稀释液加样品C上清液组：A+C，PBS+才，1640+C，B+C。
每组各设复孔。
设定好分组，接着就是按照步骤一步一步来了。
先是加入上上述分组的各溶液孵育2小时，洗涤后在加带标记抗体孵育2小时。第二次孵育时刚好可以吃午饭了。
期间，她又做了些别的实验。后来她打开电脑查看邮箱，之前构建的质粒，酶切正确的送去测序，结果应该回来了。
果然，一般来说酶切正确的质粒基本上就没问题了，但那只是间接证明DNA条带大小符合，而测序则是直接证明条带的每一个碱基都是否一致。
如此，她就该扩大带质粒的大肠杆菌培养，然后提取较多的质粒用以接下去的实验。之前保存了带质粒的大肠杆菌菌种，直接化冻，接种到液体LB培养基中，然后放在恒温摇床里培养。当然这一步现在做早了，晚上的时候再接种，然后在摇床培养过夜，第二天，提取质粒。
下午大约2点的时候，上午开始做的ELISA就可以上酶标仪检测了。王静姝又期待又忐忑的操作起酶标仪。
结果出来了，除了标准品组，用试剂盒自带稀释液的A组和A+C组都显色，且数值相近！而其他组都没有显色！
也就是说问题就出在稀释液了，稀释液里存在一种抗原能够跟包被抗体和标记抗体结合。她现在基本上推测这个试剂盒是假的了，里面的抗体和标准品（对应抗原）极有可能选用某种常见的便宜的抗原抗体。得出这样的结论还需要做一个实验。
必须用含有L因子的细胞上清液来验证。如果含有L因子的上清加稀释液A显色，不加则不显色，那么确定这套ELISA体系里的抗体绝对不是L因子的抗体。
不过目前她还没有确定L因子一定会分泌到细胞外，因此她虽然构建了过表达L的细胞系，但取其上清液如果没有显色，也不能够说明问题。
但还有另一个办法，她已经订购了一支L因子抗体兔-Anti-L，应该过几天就到了，到时候可以用该试剂盒的+标准品+Anti-L+标记抗兔二抗，若结果没有显色则说明标准品不是L因子。这个到时候在做了，现在的结果也足以说明问题，至少稀释液有问题是百分百肯定的，她必须整理一下实验数据，发给孙老师，看他怎么说。
孙书淮看到实验结果后，问她：“这试剂盒哪买的？”
王静姝递过试剂请
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